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【柏恒科技小課堂】qPCR反應(yīng)漫談（續(xù)）發(fā)布時(shí)間：2026-01-04

在上一期的qPCR反應(yīng)漫談中，從一開(kāi)始沃森和克里克兩位基因?qū)W奠基人的兩個(gè)論點(diǎn)簡(jiǎn)單延伸至染料法和探針?lè)▋深惓Ｒ?jiàn)的qPCR反應(yīng)。這一期做一個(gè)從PCR反應(yīng)過(guò)程出發(fā)到一些實(shí)驗(yàn)問(wèn)題優(yōu)化的分享。01(先拋磚）PCR反應(yīng)原理：PCR通過(guò)變性、退火和延伸三個(gè)步驟的循環(huán)往復(fù)，模擬DNA在體外擴(kuò)增的...

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2022
3-1

三槽梯度PCR儀科普知識(shí)大全，你真不一定都懂
三槽梯度PCR儀溫度的準(zhǔn)確性可能會(huì)對(duì)PCR的成敗與否起決定性作用，因?yàn)镻CR的三個(gè)主要步驟都依賴于溫度。類似地，加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對(duì)于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。因此，所使用的PCR儀能在模塊之間準(zhǔn)確到達(dá)設(shè)定的...
2022
1-21

雙槽梯度PCR儀應(yīng)該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應(yīng)原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火（復(fù)性）--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后，使模板DN...
2022
1-17

熒光定量基因擴(kuò)增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
熒光定量基因擴(kuò)增儀在操作、維護(hù)和修理本儀器的所有階段，都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說(shuō)明書其它地方指出的警告，便可能影響到儀器提供的保護(hù)。同時(shí)，這也會(huì)破壞設(shè)計(jì)和制造的安全標(biāo)準(zhǔn)以及儀器的預(yù)期使用范圍。a）儀器接地為了避免...
2022
1-11

熒光定量PCR的理論依據(jù)是什么？
熒光定量PCR在反應(yīng)中，引入了一種熒光化學(xué)物質(zhì)，隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化。從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線...
2022
1-4

二維梯度PCR的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些？
PCR技術(shù)從發(fā)明至今已有二十多年的時(shí)間，用于PCR實(shí)驗(yàn)的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過(guò)程沒(méi)有太大變化，包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應(yīng)條件、使用試劑的量甚至是引物等，很多研究者在進(jìn)行PCR優(yōu)化時(shí)都會(huì)考慮退火溫度的優(yōu)化，這時(shí)...
2021
12-27

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護(hù)方法
高分辨率溶解（HRM）作為一種聯(lián)管式的PCR后分析技術(shù)，引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行分析，與傳統(tǒng)的溶解曲線分析類似，但提高更多的信息，因而具有更廣泛的應(yīng)用。可根據(jù)PCR產(chǎn)物的序列、長(zhǎng)度、GC含量或鏈...

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